Digital PCR (Dijital PZR , digital PCR, DigitalPCR, dPCR, dePCR)
Nükleik asidlerin tayini , miktar ölçülmesi ve analizi için geliþtirilmiþ yeni bir tekniktir.
Doðrudan veya klonal olarak DNA, cDNA ya da RNA dahil olmak üzere nükleik asitleri amplifiye etmek için kullanýlabilir.
DPCR ve geleneksel PCR arasýndaki en önemli fark, eski PCR göre daha kesin bir yöntem olmasýdýr. Nükleik asitlerin miktar ölçümü için kullanýlan yöntem hassasiyeti ve özgüllüðü arttýrmaktadýr.
Geleneksel PCR 'da tek numune baþýna bir reaksiyonu yürütmektedir. dPCR ayný zamanda, bir numune içinde tek bir reaksiyon yapar, ancak numune bölümleri bir çok kýsýma ayrýlýr ve reaksiyon, her bir bölme içinde gerçekleþtirilir. Bu ayýrma daha güvenilir toplama ve nükleik asit miktarlarý hassas ölçümünü saðlar. Bu tür kopya sayýsý varyantlarý ve nokta mutasyonlarý gibi bir yöntem gen sekanslarýnýn varyasyonlarýný çalýþmak için yararlý olarak elde edilmiþ ve rutin numune için klonal amplifikasyonu için kullanýlan bir yöntem olmuþtur. (Ör: next-generation sequencing.)
Digital PCR is a new approach to nucleic acid detection and quantification. It offers a different method for absolute quantification and rare allele detection relative to conventional real-time quantitative PCR.
Real-Time PCR—also called quantitative polymerase chain reaction (qPCR)—is one of the most powerful and sensitive gene analysis techniques available and is used for a broad range of applications including quantitative gene expression analysis, genotyping, SNP analysis, pathogen detection, drug target validation, and for measuring RNA interference. Frequently, real-time polymerase chain reaction is combined with reverse transcription to quantify messenger RNA (mRNA) and microRNA (miRNA) in cells or tissues.
As the name suggests, real-time PCR measures PCR amplification as it occurs. This completely revolutionizes the way one approaches PCR-based quantitation of DNA and RNA. In traditional PCR, results are collected after the reaction is complete, making it impossible to determine the starting concentration of nucleic acid.
Digital PCR is a new approach to nucleic acid detection and quantification, which is a different method of absolute quantification and rare allele detection relative to conventional qPCR, because it directly counts the number of target molecules rather than relying on reference standards or endogenous controls.